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STEMCELL近期推出新的EasySep试剂盒:EasySep死细胞去除试剂盒 (Annexin V)(产品号 #17899)。
产品简介:
细胞制备物中如果存在大量死细胞,会增加识别目的细胞的难度。另外,死细胞也会影响一些下游应用。EasySep死细胞去除试剂盒(Annexin V)用于从细胞或组织中去除死细胞。在细胞凋亡过程中,磷脂酰丝氨酸重新分布于细胞外层。Annexin V蛋白可以与磷脂酰丝氨酸结合,之后通过EasySep磁珠和可识别Annexin V的抗体将这些死细胞去除。
产品特点:
实验步骤快捷。样本处理最少只需6分钟(使用紫色EasySep磁极),而美天旎死细胞去除试剂盒需要至少35分钟。
不会发生分选柱阻塞的情况。对于从肿瘤或其他组织中富集活细胞,如使用分选柱方法,分选柱极易阻塞。而我们的无柱分选体系则不会出现这种情况。
灵活。客户可将此试剂盒用于多种组织或细胞,或者与其他的EasySep分选试剂盒配合使用。
产品效果:
产品性能通过分选后活细胞比例或者去除的死细胞比例来衡量,对于不同的样本比例也会不同。下面是我们使用几种不同的样本所做的测试:
以上数据使用紫色EasySep磁极得到。
样本兼容性:
此试剂盒可用于多种样本。我们测试过的样本包括(但不仅限于):
使用Staurosporine(星形孢菌素)处理过的Jurkat细胞、缓慢复苏(促使细胞死亡)的冻存PBMC、使用Mitomycin C(丝裂霉素C)处理的PBMC、小鼠脾脏、小鼠肺组织、4T1小鼠来源的乳腺癌组织和皮下肿瘤组织、外周血单个核细胞。
和其他EasySep试剂盒的兼容性:
客户可先使用此试剂盒来去除死细胞,然后使用其他EasySep试剂盒分选目的细胞。我们测试了8个人和小鼠的分选试剂盒和不同的样本,证明死细胞去除试剂盒可以和其他试剂盒配套使用,且不会影响分选效果。
使用要点:
Annexin V蛋白或基于磷脂酰丝氨酸的试剂盒只会去除死细胞或即将死去的细胞,在这些细胞中磷脂酰丝氨酸转移到细胞膜表面并且与Annexin V蛋白结合。这种现象会发生在:细胞凋亡的各个阶段,或者细胞坏死的早期阶段(例如,细胞膜还在的阶段)。
需要注意:此试剂盒不能去除完全坏死的细胞,因为这些细胞已经失去细胞膜。此试剂盒也不能去除细胞碎片。
适用磁极和实验时间:
EasySep Magnet (6分钟) 、 “The Big Easy” EasySep Magnet (6分钟) 、 EasyEights EasySep Magnet (13分钟)。
流式分析:
客户可以使用流式来检测细胞存活率。结合荧光的Annexin V 碘化丙啶(PI)(产品号 #75002)
活细胞为PI阴性和Annexin V阴性。凋亡细胞为PI阴性和Annexin V阳性。坏死细胞为PI阳性和Annexin V阳性。