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类器官技术的持续应用推动了新工具和应用的发展。对类器官培养系统的鉴定推动了对干细胞龛以及体外培养干细胞所需的因子的进一步研究。此外,目前科学家正在努力研发功能性实验,旨在用于为精准医疗制定明智的决策或在药物开发过程中进行药物反应筛选。目前从肿瘤活检培养出的类器官,能够查看特定患者的治疗效果并创建活检的生物信息库,从而对发病机制进行进一步研究。类器官技术的推行提供了一系列允许转导、转染和使用 CRISPR/Cas9进行基因组编辑的工具和技术。肠类器官和肠道微生物的共培养促进微生物和宿主上皮细胞之间相互作用的详细研究,从而了解发病机制。此外类器官可以与其他组织,如神经元和间质合并生长,对在体内发生的复杂相互作用和信号传导提供了优质模型。
IntestiCult™类器官生长培养基 (人)的优势:
完全。完全培养基,不需要添加其他细胞因子或者生长因子。
相关。使肠道干细胞和其分化细胞的培养和扩增变得简单。
高效。在不到一周的时间内持续生成肠类器官。
方便使用。格式简单、浅显易懂的优化步骤。
随着操作类器官培养物的新工具不断被开发,类器官也越来越被视为高度相关的模型系统。
IntestiCult™类器官生长培养基(人)
IntestiCult™类器官生长培养基(人)是一种完全的培养基,用于从结肠样本或者之前冷冻的结肠类器官有效地建立肠类器官和对其长期的培养。将分离的肠隐窝在培养基中进行培养,不到一周的时间,即可观察到类器官,每 7到14天传代一次。在 IntestiCult™中生长的类器官适合用于肠道干细胞群的扩增和长期维持培养,确保为下游应用稳定供应类器官 。
类器官生长效率:
图3. 在IntestiCult™类器官生长培养基(人)中培养(A)2天、 (B)6天、(C)8天和(D)10天后的原代类器官,通过光学显微镜成像。(E)类器官在多次传代后依然有效增长。
A首次传代增长百分比为48.8 ± 4.5%,第二次及第三次传代分别增长至 85.4 ± 1.4%和96.5 ± 3.9%(n=3-4)。
蛋白质定位:
图4. 在IntestiCult™类器官生长培养基(人)中生长的类器官表达肠上皮细胞的标志物。
荧光染色肠类器官结果显示(A)DAPI、( B)EPCAM以及( C)Ki67。( D)显示增殖活跃的祖细胞(Ki67+)位置的合并图象。
Forskolin膨胀检测:
图4. Forskolin诱导的类器官膨胀采用。
(A)5μM Forskolin或者(B)DMSO处理类器官。在 0分钟和120分钟时测量类器官面积。与对照组类器官(n=3)7.5 ± 0.8%相比,经 Forskolin处理的类器官的大小增加33.5 ± 3.8%。。
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