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更好的培养基——mTeSR™ Plus更换攻略

mTeSR™ Plus配方基于mTeSR™1(发表文献最多的feeder-free hPSC维持培养基),使用了更稳定的成分(如FGF2),使细胞培养时的pH值能稳定在7.0以上,既确保细胞正常的糖酵解率,又保护了细胞的DNA不被破坏。

在常规换液条件下,培养基支持接种更多数量的细胞,且在大大减少换液次数的情况下保证细胞质量。mTeSR™ Plus与多种培养基质兼容,包括Corning® Matrigel®,hESC-Qualified Matrix和Vitronectin XF™。

相比传统feeder-free培养基(如mTeSR™1),mTeSR™ Plus的能够使您培养的细胞获得更大的细胞集落,更快的扩增速度,以及更高的克隆效率。

此外,鉴于此次新型冠状病毒COVID-19疫情造成的诸多不便,灵活的工作方式将更适合实验的开展。mTeSR™ Plus可以自定您的hPSCs培养方案,选择双倍换液可以间隔两天换液一次,无需每天通勤进行实验,可以降低感染风险。

为了让老师们能够更方便地从原有培养基转换到mTeSR™ Plus这一优秀的培养基。今天,就让小编为各位老师带来如何将人ES或iPS细胞从其他feeder-free培养基转移到mTeSR™ Plus中培养的操作流程。


操作流程

1. 用Corning® Matrigel®或Vitronectin XF™包被6孔板。包被后按下图每孔添加2 mL培养基。


注:做两孔原培养基(本文所述的原培养基为mTeSR™1)的平行对照组。

2. 用ReLeSR™或温和细胞解离试剂解离细胞制备细胞聚集体。

3. 接种细胞:

  • 培养板的第1列,使用原培养基的传代细胞密度进行传代。
  • 培养板的第2列,使用原培养基的传代细胞密度进行传代。
  • 培养板的第3列,降低25%密度进行传代。
4. 轻快地前后左右晃动培养板,使细胞分布得更均匀。37°C孵育24小时。

5. 按照每孔内培养基的种类,适时更换培养基。每1到2天观察一下细胞的生长情况。

  • mTeSR™1:每天更换一次培养基。
  • mTeSR™ Plus:每1到2天更换一次培养基。若需要每2天更换培养基,请加入2倍体积的培养基。

6. 根据细胞的生长情况,准备传代细胞。mTeSR™ Plus培养的细胞由于长得更快可能需要更早地传代。

7. 传代mTeSR™ Plus培养的细胞时,参照之前的传代密度。如果观察到细胞生长过快,可以降低20%密度。

注:解离孵育的时间需要根据实际情况相应调整;使用非酶传代试剂时应该在显微镜下观察细胞解离情况,确定最佳间。

实验所需的产品列表,点击产品名,阅读更多信息。

产品名

产品号#

mTeSR™ Plus

05825

mTeSR™1

85850

Vitronectin XF™

07180

ReLeSR™

05872

温和细胞解离试剂

07174


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