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T细胞研究的流程化工具


STEMCELL Technologies在T细胞分选、激活、扩增、分析和冻存方面拥有一整套产品,其快速、灵活且兼容性大的优势特点可将T细胞研究工作流程化,帮助您在竞争激烈的基础T细胞免疫学和临床T细胞工程改造研究领域中先人一步,取得成功!


说明:快速、简便的无柱免疫、或免疫密度梯度细胞分选平台,可分选高纯度的T细胞。
• 快速:细胞分选流程仅需8分钟
• 兼容性大:可分选0.1 - 40 mL的样本量
• 温和:无分离柱系统,无需一次性耗材
• 简单而集成的工作流程:磁珠不干扰下游应用,或可被快速去除

说明:T细胞激活和扩增的可溶性试剂。

• 灵活:具可溶性,且易于洗脱
• 稳定:在2 - 8°C下至少可稳定储存两年
• 可购买:并非独家授权用于基因修饰T细胞的生产

说明:用于T细胞扩增的无血清且无异种成分的培养基。

• 成分确定:使T细胞扩增具一致性
• 经过优化:其配方适于T细胞的快速扩增
• 维持T细胞表型:与使用含血清培养基培养的T细胞具有相似的表型和功能

说明:已通过验证,可与STEMCELL的细胞分选、细胞培养试剂兼容使用。


说明:符合cGMP标准生产的无动物源成分且无血清的T细胞冷冻保存液。
• cGMP标准生产:组成成分均为最高品质
• 可提供FDA认证文件:可用于临床应用
• 基于细胞的质量控制测试:确保长期储存后保持高存活率和最大的细胞回收率

(1)使用EasySep™从全血、白细胞单采术样本或PBMC中分选高纯度的T细胞,以开始您的T细胞研究流程


图1. 通过EasySep™试剂盒负选的T细胞具有高纯度。

起始样本为人外周血单个核细胞(PBMCs),通过EasySep™人T细胞分选试剂盒(产品号#17951)进行分选,分选后的组分中T细胞(CD3+)含量通常可达98.2%。

图2. 通过EasySep™试剂盒正选的T细胞具有高纯度。

起始样本为人PBMCs,通过EasySep™人CD3正选试剂盒II(产品号 #17851)进行分选,分选后的组分中CD3+细胞含量通常可达99.4%(平均值 ± 标准差)。

(2)通过ImmunoCult™-XF T细胞扩增培养基中的ImmunoCult™人CD3/CD28或CD3/CD28/CD2激活剂对分选的T细胞进行激活


图3. T细胞在经过ImmunoCult™人CD3/CD28或CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂刺激后被活化。

通过EasySep™分选的T细胞使用添加了ImmunoCult™人CD3/CD28 T细胞激活剂(产品号#10971)或ImmunoCult™人CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂(产品号#10970)的ImmunoCult™-XF T细胞扩增培养基(产品号#10981)在第0天开始培养。以CD4+ T细胞和CD8+ T细胞设门,并通过CD25+在第0天和第3天的表达评估T细胞的活化程度。培养开始时的CD25+细胞细胞群含量为(A)5.63 ± 2 .4%(平均值± 标准差)。经三天活化后,以ImmunoCult™人CD3/CD28 T细胞激活剂和ImmunoCult™人CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂活化和ImmunoCult™人CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂活化的CD25+细胞群含量分别为(B)75.4 ± 13.8%和(C)88.8 ± 3.2%(平均值± 标准差)。


图4. 使用ImmunoCult™人CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂活化的T细胞呈现被活化的形态。

分别使用(A)可溶的ImmunoCult™人CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂和(B)基于磁珠的激活竞品试剂对通过EasySep™分选的T细胞进行激活后的图像。
(3)使用ImmunoCult™-XF T细胞扩增培养基和rhIL-2培养激活的T细胞,以对其进行扩增


图5. 当使用ImmunoCult™-XF T细胞扩增培养基进行培养时,T细胞表现出强劲的扩增能力。
将T细胞在添加了ImmunoCult™人CD3/CD28 T细胞激活剂或ImmunoCult™人CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂的ImmunoCult™-XF T细胞扩增培养基(含rhIL-2)中扩增超过14天。在第0天至第14天测定其扩增倍数(请注意:扩增过程中T细胞未被重新活化)。
图6. T细胞在ImmunoCult™-XF T细胞扩增培养基中培养14天后仍保持活性。
将T细胞在添加了ImmunoCult™人CD3/CD28 T细胞激活剂或ImmunoCult™人CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂的ImmunoCult™-XF T细胞扩增培养基(含rhIL-2)中扩增超过14天。在第0天至第14天测定其活性(请注意:扩增过程中T细胞未被重新活化)。
(4)使用STEMCELL的抗体检测扩增后的T细胞的表型和功能



(5)使用CryoStor®冻存扩增后的T细胞