STEMdiff™定型内胚层定向分化试剂盒

STEMdiff™定型内胚层定向分化试剂盒是一个成分确定、无动物成分的系统，可将人多能干细胞（hPSCs）分化为多向的定型内胚层，且采用的流程快速而简单（图1）。该产品的配方优化用于以mTeSR™1或TESR™-E8™培养的hPSCs。通过这两种方法进行定型内胚层分化的hPSCs均可得到高度富集的定型内胚层，即显示SOX17、CXCR4和FOXA2的共表达（图2-4）。而且，对多种人胚胎干（hES）和诱导多能干（hiPS）细胞系的分化均十分高效且具可重复性（图2）。使用该试剂盒生成的定型内胚层可进一步分化为各种下游内胚层细胞类型，包括肝细胞和胰腺前体细胞等（图5），可用于药物开发、毒性测试、细胞治疗的开发，以及发育途径等方面的研究。

STEMdiff™定型内胚层定向分化试剂盒的优势：
• 成分确定、无血清、无动物成分
• 已优化用于以mTeSR™1或TESR™-E8™维持培养的细胞
• 可高效且重复性地对多种hES细胞和hiPS细胞系进行诱导分化
• 分化的细胞共表达SOX17、CXCR4、FOXA2和c-Kit
• 生成的内胚层具有功能性，可分化为多个下游谱系

快速、简单的流程：

图1. 分化流程

图2. 无论使用哪种hPSC维持培养基，多种hES和hiPS细胞系均可在定型内胚层分化培养基中高效分化为定型内胚层

通过CXCR4和SOX17的共表达对多种hES（H1和H9）及hiPS（WLS-4D1和STiPS-M001）细胞系形成的定型内胚层进行的定量分析。以STEMdiff™定型内胚层定向分化试剂盒对维持培养于mTeSR™1培养基中的细胞进行分化，以优化用于TESR™-E8™的STEMdiff™定型内胚层定向分化试剂盒对维持培养于TESR™-E8™培养基中的细胞进行分化。表达两种标志物的细胞数据以平均百分比表示。误差线为标准误差，n=4 -18/细胞系。

图3. STEMdiff™定型内胚层定向分化试剂盒引导向内胚层谱系发生特异性分化

该热图显示了H9 hES细胞的关键多能性（Pluri）、内胚层（Endo）、中胚层（Meso）和外胚层（Ecto）谱系标志物和细胞贴壁（Adh）基因的表达数据。使用Illumina人HT-12 V4 BeadChip芯片进行数据采集。高表达的基因显示为红色，表达最低的基因显示为绿色。hPSCs维持培养于mTeSR™1中，用以下两种方法进行定型内胚层定向分化：形成类胚体，再在10%的血清中自发分化5天；或者使用STEMdiff™定型内胚层定向分化试剂盒。

图4. hPSCs在使用STEMdiff™定型内胚层定向分化试剂盒进行分化后高效表达定型内胚层的重要标志物

（A）在mTeSR™1中培养的H1 hES细胞，在分化5天后CXCR4和SOX17表达的代表密度图像。（B）分化4天后WLS-4D1 hiPS细胞中FOXA2（绿色）和SOX17（红色）的代表图像。黄色表示共表达FOXA2和SOX17的细胞。

图5. 以STEMdiff™定型内胚层定向分化试剂盒生成的定型内胚层能够在下游分化为多种谱系
在使用STEMdiff™定型内胚层定向分化试剂盒生成定型内胚层后，按照已发表的、针对胰腺1或肝脏祖细胞2的流程进一步对细胞进行分化。（A）将H9衍生的定型内胚层分化为胰腺祖细胞，并对其进行流式细胞分析后，可见典型的PDX-1和NKX6.1共表达（圆圈内区域）。（B）将H9衍生的定型内胚层进行分化后，可见肝脏祖细胞的人血清白蛋白（Human Serum Albumin，HSA）免疫反应性的典型表达。

咨询与购买请联系上海嘉远生物科技有限公司

上海嘉远生物科技有限公司

电话：021-54826138 021-34224249
手机：13764592719
传真：021-34224249-8008
全国服务热线：400 670 9909
邮箱：tech@jiayuanbio.com
网址：www.jiayuanbio.com