新TeSR™-E8™--人多能干细胞的无饲养层培养基

新产品TeSR™-E8™是成分确定的、无需饲养层细胞的培养基，用于维持人多能干细胞的培养。TeSR™-E8™的配方是以该领域的顶级研究团队—James Thomson博士实验室（University of Wisconsin-Madison）所发表的E8配方为基础；另外mTeSR™1培养基的配方也为该团队所研发。

正如mTeSR™1培养基一样，TeSR™-E8™培养基也具有十分优良的品质。它只包含用于维持胚胎干细胞（embryonic stem cell, ES）及诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cell, iPS）的必要成分，为多能干细胞培养提供了一种更为简单的培养基。可将其与用于包被培养皿的的BD Matrigel™hESC-Qualified Matrix或Vitronectin XF™配合使用。

使用TeSR™-E8™培养多能干细胞可维持其典型形态特征（图1），细胞具有高扩增率（图2），表达高水平的多能性标志物（图3），且保持了形成类胚体的能力（图4）。
TeSR™-E8™培养基是对目前用于hESC和hiPSC研究的最完全，且成分确定的试剂体系的最新补充，它包括：
• 使用mTeSR™1、TeSR™2和TeSR™-E8™进行无需饲养层细胞条件的培养
• 使用AggreWell™可重复性地培养大小均一的类胚体
• 使用STEMdiff™产品使hESCs和hiPSCs得以最优化地分化为特定的细胞系
• 使用mFreSR™或CryoStor™冻存细胞
• 使用EasySep™分选SSEA-4+或TRA-1-60+ 细胞

图1. 在 TeSR™-E8™中培养的人ES和iPS正常的细胞形态。

使用TeSR™-E8™在BD Matrigel™基质中培养的未分化（A）人ES（H9）和（B）人iPS（WLS-1C），细胞保持了该细胞类型所具有特征，核仁明显，核质比较高。在即将传代时，细胞紧密排列和形成多层结构的特征非常显著。

图2. 细胞在TeSR™-E8™培养基中呈现高扩增率。

上图显示使用TeSR™-E8™在BD Matrigel™基质中培养的人ES和iPS细胞在传代超过10次（棕色）过程中，每一代的平均扩增倍数+/-SEM的情况。同时也显示了用mTeSR™1以类似方案培养人ES细胞作为对照的数据（灰色）。扩增率以收获时的细胞总量与接种时的细胞总量之比进行衡量。请注意：该数据代表的是在传代6-7天后的培养情况；若培养时间短，则应考虑到扩增率也将相对较低。

图3. 使用TeSR™-E8™培养基培养的细胞有多能性标志物的表达

（A）使用TeSR™-E8™传代10次后，以FACS检测H9人ES细胞和WLS-1C人iPS细胞多能性标志物（SSEA-3和OCT-4）（蓝色=样品，黑色=二抗）。
（B）使用TeSR™-E8™传代18次后，以OCT-4免疫染色鉴定H1细胞。

图4. 使用TeSR™-E8培养的细胞分化形成的大小均一的类胚体

通过标准化技术将用TeSR™-E8™培养基在BD Matrigel™基质上培养的H1细胞解离为单个细胞，然后接种于含AggreWell™培养基和10 μM Y-27632的AggreWell™ 400培养板上培养24小时（A），然后再转至超低粘附培养板（ULA）中以进行观察（B）。请访问www.stemcell.com并查看AggreWell™手册（文件号#29146）对该实验的说明。

定制您自己的细胞传代时间表：在第4-7天内的任意时间进行传代
下一次传代后的细胞数量主要取决于最初接种的细胞总量、密度，以及传代时的集落密度。下表显示了在使用TeSR™-E8™培养基进行培养时，如何通过调控这三个因素而使人ES和iPS细胞得以在接种后第4-7天内即进行传代。无论接种密度或细胞总量如何，在准备传代前都应保证集落在中央位置密集且多层地分布。请查看图5显示的传代最佳视野的典型示例。
影响下一次细胞传代时间的可控参数：

图5. 这一培养于TeSR™-E8™中的培养物可在第5-7天内的任意时间进行传代，其中以第6天为最佳

在传代后，使用TeSR™-E8™在BD Matrigel™基质上培养的H1 ES细胞分别在第1-7天的情况（放大20x）。

TeSR™-E8™产品规格

hPSC培养的相关补充试剂

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