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无动物成分的造血祖细胞扩增培养基:
大多数培养和扩增造血细胞的无血清培养基都含有动物成分或从人血浆中提取的成分。尽管这些培养基对于造血祖细胞的扩增研究非常有用,但应用于细胞治疗方面的造血干细胞扩增方法的进一步发展和应用,需要的则是不含任何动物或人源成分的培养基。
STEMCELL Technologies Inc.研发出了一种全新的无动物成分(ACF)的扩增培养基,StemSpanTM-ACF,只含有重组成分和合成成分。这种新的培养基已经经过了脐血(CB)和骨髓(BM)源性造血细胞扩增实验的广泛测试,并且与STEMCELL Technologies的其他无血清扩增培养基StemSpanTM SFEM和StemSpanTM H3000进行了比较。
使用EasySepTM脐带血CD34正选试剂盒(产品号 #18096)或EasySepTM人祖细胞富集试剂盒(产品号 #19056)分选出人脐血CD34+细胞,以104个细胞/mL的浓度把细胞分别接种到添加了StemSpanTM细胞因子混合物100(CC100*)StemSpanTM-ACF、StemSpanTM H3000(无异种成分)和StemSpanTM SFEM(无血清)培养基中培养7天。*扩增的细胞被抗人CD34和CD45抗体染色。7-AAD用于区别失去活性的细胞。细胞通过流式细胞术收集并计数。
总有核细胞(TNC)在三种培养基中的扩增程度相近。但与StemSpanTM SFEM和StemSpanTM H3000相比,CD34+细胞在StemSpanTM-ACF中的扩增效率明显增高(图1)。使用StemSpanTM CC110*细胞因子混合物扩增骨髓来源的CD34+细胞,也可以得出相似的实验结果(数据未显示)。
StemSpanTM-ACF的优势:
• 成分确定,无动物成分组成(不含动物或人源成分)
• 增强实验结果的一致性
• 降低引入不确定成分的风险
StemSpanTM-ACF的应用**:
• 扩增来源于骨髓、动员的外周血和脐带血的造血细胞
• 生成大量成熟的红细胞和特殊谱系细胞:
• 红系造血祖细胞
• 成熟的红细胞
• 粒细胞
• 单核细胞/巨噬细胞
• 树突状细胞
• 巨核细胞
• 扩增具有移植后重建造血功能的干细胞
订购信息:
图 1. 人CB造血细胞的培养中,TNC和CD34+细胞分别在添加了StemSpanTM CC100细胞因子混合物的StemSpanTM H3000、SFEM和ACF中的扩增
*显著差异,配对t-test。
实验结果显示了7天培养之后,总有核细胞(TNC)和CD34+细胞成倍增长的平均值±标准偏差(n = 10)。
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