RayBiotech抗体芯片在外泌体研究中的应用

Exosome（外泌体）是细胞向胞外分泌的囊泡类小体，直径约为30-150 nm之间，具有典型的脂质双分子层膜结构，可存在于细胞培养上清液、血浆、血清、唾液、尿液、羊水和恶性腹水以及其它生物体液中；其携带有母细胞的多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等重要信息，在细胞-细胞间的物质和信息传递中起重要作用。

外泌体最初是在1986年被发现，直至2007年，H.Valadi等发现，细胞之间可以通过外泌体中的RNA来交换遗传物质，研究人员逐渐对小小的外泌体产生了极大的好奇。2013年的诺贝尔生理或医学奖颁给了三位科学家，他们分别是美国科学家James E. Rothman和Randy W. Schekman，德国科学家Thomas C. Südhof，以表彰他们发现细胞内部囊泡（外泌体等）运输调控机制。外泌体的研究达到全新的高度。就外泌体的研究方向而言，干细胞、免疫、microRNA、靶向给药、癌症的诊断及治疗等都是热门研究领域。

目前，已有越来越多的学者开始关注外泌体在肿瘤发生和发展中的作用及其机制，外泌体将在癌症的诊断及治疗等领域发挥重要作用。RayBiotech为您提供多种蛋白芯片产品，给科研人员提供一个专业化的外泌体研究平台。

杂志名称: International Journal of Proteomics

文献题目：Proteolytic Potential of the MSC Exosome Proteome: Implications for an Exosome-Mediated Delivery of Therapeutic Proteasome

本实验所用产品：RayBiotech人AAH-BLM-1抗体玻片芯片 （507个炎症、趋化、生长、血管生成等细胞因子抗体芯片）

实验样品：外泌体

研究背景:

目前，间充质干细胞已被频繁使用于当前的干细胞治疗的临床试验中。起初，人们认为间充质干细胞治疗机制是移植的间充质干细胞在损伤部位分化后代替受损细胞，然而小于1%的移植细胞能够到达受损部位而大多数细胞则转移到肝、脾脏、肺部，并且到达受损部位的间充质干细胞并不能消除细胞融合的可能性而导致治疗失败。越来越多的例子表明间充质干细胞的治疗效果并不是依赖于间充质干细胞在受损部位的种植及其分化能力。随后的研究发现间充质干细胞具有治疗效果的成分是其分泌的外泌体。外泌体是一种分泌型的大约50-100nm大小的囊泡，承载各种复杂的有机物。外泌体为间充质干细胞分泌物有效治疗多种疾病（例如心肌梗死、晚期局部缺血性心脏病、成骨不全症、脆骨症、肌萎缩性脊髓侧索硬化症）等提供了分子基础，然而其具体的作用机制尚未阐明。

研究思路：

1、 分组：人间充质干细胞huES9.E1分泌的外泌体、非条件培养基

2、 RayBiotech芯片检测细胞因子在外泌体中的表达水平

为了研究人间充质干细胞分泌的外泌体是否通过阳性表达某些细胞因子参与间充质干细胞的治疗机制，本文采用RayBiotech 标记法抗体芯片AAH-BLM-1对人间充质干细胞huES9.E1分泌的外泌体进行检测，并以芯片上外泌体组的蛋白信号值大于非条件培养基组的蛋白信号值2倍以上为蛋白在外泌体中阳性表达。芯片数据分析结果显示，101个蛋白在外泌体中阳性表达。