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树突状细胞培养之攻略二

在树突状细胞培养之攻略一中,我们知道已经DC培养分两步,这一次我们就来扒一扒用到的那些细胞因子们。  

Step 1:  

GM-CSF(粒细胞巨噬细胞集落刺激因子):GM-CSF可以促进单核细胞向巨噬样细胞分化,细胞表面MHC II类分子的表达得以提高,从而增强细胞的抗原递呈功能。同时,可促进DC的存活。   

IL-4 (白细胞介素-4):IL-4可以在由单核细胞诱导成DC的过程中抑制巨噬细胞的过度生长。 如果不加IL-4,单核细胞将分化为巨噬细胞。同时,IL-4还有降低细胞表面表达CD14分子的能力。  

未成熟的DC具有较强的抗原摄取和加工能力,但抗原递呈能力很弱。细胞表面中度表达MHC I类、II类分子和B7家族分子(CD80, CD86等),但不表达或低表达CD14。  

Step 2:  

TNF-α/IL-1β/ IL-6 (肿瘤坏死因子-α/白介素-1β/白介素-6):这三种细胞因子都是炎性细胞因子,均可下调未成熟DC的巨胞饮作用和表面Fc受体的表达,使细胞内MHC II类分子区室(class II compartment)消失,上调细胞表面MHC I类、II类分子和B7家族分子(CD80, CD86等)的表达, 使未成熟DC分化为成熟DC。  

此时DC的抗原摄取和加工能力明显减弱,而抗原递呈能力显著增强,可极强地激活T细胞。但是迁移能力较弱。  

PGE2 (prostaglandin E2,前列腺素E2):PGE2也是炎性介质,在TNF-a/IL-1b/IL-6成熟诱导组合中添加PGE2,可进一步提高DC的产量、成熟度、迁移能力和免疫激活能力。  

添加PGE2后诱导成熟的DC因表面趋化因子受体的高表达,而更容易迁移至淋巴结,而引起机体对抗肿瘤的免疫反应。  PeproTech给您提供全面的高质量的细胞因子

注:Animal Free意为无动物成分。无动物成分的重组细胞因子在生产过程中不会有任何动物源性的物质,尤其是牛的病原体和蛋白的混入,使得最终获得的重组人蛋白中不含任何动物成分,这样可以避免动物病原体(如疯牛病,克雅氏病等)的污染及外源蛋白引起的机体一种排斥和过敏反应,因此细胞治疗的体外培养过程中最好使用无动物成分的重组细胞因子。  

怎么鉴定培养的DC呢?BioGems流式抗体供您选择!

注:用于DC鉴定的表面标志物的表达在流失图上均呈现单个峰,且多数情况下不能与阴性峰完全区分开来,为避免多色分析时补偿调节不好导致结果的不确定性,建议最好用单标,最多用双标来做DC表面标记的分析,且必须使用同型对照,而非空白细胞对照来排除背景染色。