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小鼠调节性T细胞鉴定方案
鼠调节性T细胞的标记是CD4+CD25+FoxP3+,FoxP3涉及胞内染色,染色步骤与胞内细胞因子染色类似(细胞没有刺激过程,先表面染色,再固定破膜,胞内染色）。
Tips：FOXP3检测的关键在于FOXP3克隆号和破膜剂,FOXP3克隆号有3G3,MF23,以及FJK-16s,其中 FJK-16s克隆号分群最明显,建议选择该克隆号的FOXP3,破膜剂使用不当会造成很高的背景以及细胞分群不明显,我们可以提供FJK-16s克隆号的FOXP3以及优质的破膜剂（细胞形态改变小,分群清晰,背景低）
小鼠调节性T细胞鉴定结果
人外周血调节性T细胞检测方案
人外周血调节性T细胞鉴定结果
Tips：以上是通过检测FOXP3鉴定Treg,该方案比较传统,操作相对复杂,目前流行通过CD127来检测 人Treg,详情请看下文。
人外周血调节性T细胞鉴定方案
人外周血Treg鉴定结果(胞膜)
1、取外周血100 μl于EP管或流式管中,加入相应的流式抗体(每种抗体5 μl),室温避光孵育15 min；2、加入1 ml红细胞裂解液(1x),室温避光裂解8 min,裂解过程中混匀一次；
3、500 g/min离心,弃去上清,加入1 ml PBS洗涤一次；
4、500 g/min离心,弃去上清,加入0.5 ml PBS重悬细胞,并上机检测分析；
Tips：CD127是2006年国外发现的一种检测CD4+CD25+调节性T细胞的新指标,由于不用破膜所以要比 Foxp3方便,CD4+CD25+纯化的细胞中Foxp3的表达与CD127低表达相关,通过CD4+CD127low纯化出的CD4+CD25+T细胞与Foxp3纯化的CD4+CD25+T细胞数量相似,并且这部分细胞展现了CD4+CD25+Treg的典型特征,目前认为CD4+CD25+CD127-/low是较CD4+CD25+Foxp3+更有价值的特异性检测Treg 的分子表面标记。人外周血调节性T细胞鉴定结果
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